kpcczКомплексные проблемы сердечно-сосудистых заболеванийComplex Issues of Cardiovascular Diseases2306-12782587-9537Federal State Budgetary Institution “Research Institute for Complex Issues of Cardiovascular Diseases”10.17802/2306-1278-2019-8-3-60-71kpccz-587Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯORIGINAL STUDIESВЛИЯНИЕ ЖЕНСКОЙ АУТОСЫВОРОТКИ КРОВИ НА АЛЛОГЕННЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ В КРАТКОСРОЧНОЙ КУЛЬТУРЕ ЛИМФОЦИТОВ СУПРУГОВ, ИМЕЮЩИХ ДЕТЕЙ С КОНОТРУНКАЛЬНЫМИ ПОРОКАМИEFFECTS OF FEMALE BLOOD AUTOSERUM ON ALLOGENIC INTERACTIONS IN SHORT-TERM LYMPHOCYTE CULTURES OF PARENTS HAVING CHILDREN WITH CONOTRUNCAL HEART MALFORMATIONShttps://orcid.org/0000-0003-2922-3438ГоршковаС. В.GorshkovaS. V.

лаборант-исследователь лаборатории клеточных технологий отдела экспериментальной и клинической кардиологии 

Сосновый бульвар, 6, Кемерово, Российская Федерация, 650002

laboratory assistant at the Laboratory of Cell Technologies, Department of Experimental and Clinical Cardiology

6, Sosnoviy Blvd., Kemerovo, Russian Federation, 650002

ШмулевичС. А.ShmulevichS. A.

кандидат медицинских наук, заведующая отделением детской кардиологии 

Сосновый бульвар, 6, Кемерово, Российская Федерация, 650002

PhD, Head of the Pediatric Cardiology Department

6, Sosnoviy Blvd., Kemerovo, Russian Federation, 650002

https://orcid.org/0000-0002-8785-7896ШабалдинА. В.ShabaldinA. V.

доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник лаборатории клеточных технологий отдела экспериментальной и клинической кардиологии; профессор кафедры микробиологии, иммунологии и вирусологии 

Сосновый бульвар, 6, Кемерово, Российская Федерация, 650002

ул. Ворошилова 22а, Кемерово, Российская Федерация, 650056

PhD, leading researcher at the Laboratory of Cell Technologies, Department of Experimental and Clinical Cardiology; Professor at the Department of Microbiology, Immunology and Virology

6, Sosnoviy Blvd., Kemerovo, Russian Federation, 650002

22a, Voroshilova St., Kemerovo, Russian Federation, 650029

weit2007@ya.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6162-4808ДееваН. С.DeevaN. S.

лаборант-исследователь лаборатории клеточных технологий отдела экспериментальной и клинической кардиологии 

Сосновый бульвар, 6, Кемерово, Российская Федерация, 650002

 

laboratory assistant at the Laboratory of Cell Technologies, Department of Experimental and Clinical Cardiology

6, Sosnoviy Blvd., Kemerovo, Russian Federation, 650002

https://orcid.org/0000-0002-4467-8732ЦепокинаА. В.TsepokinaA. V.

младший научный сотрудник лаборатории геномной медицины отдела экспериментальной и клинической кардиологии  

Сосновый бульвар, 6, Кемерово, Российская Федерация, 650002

research assistant at the Laboratory of Genomic Medicine, Department of Experimental and Clinical Cardiology

6, Sosnoviy Blvd., Kemerovo, Russian Federation, 650002

ЛукоянычеваЕ. Б.LukoyanychevaE. B.

заведующая иммунологической лабораторией 

 Октябрьский пр., 22, Кемерово, Российская Федерация, 650061

Head of the Immunology Laboratory

22, Oktyabrskiy Av., Kemerovo, Russian Federation, 650066

ВавинГ. В.VavinG. V.

кандидат медицинских наук, заместитель главного врача по клинико-диагностической службе 

 Октябрьский пр., 22, Кемерово, Российская Федерация, 650061

PhD, Deputy Director Medical

22, Oktyabrskiy Av., Kemerovo, Russian Federation, 650066

https://orcid.org/0000-0002-8874-0788АнтоноваЛ. В.AntonovaL. V.

доктор медицинских наук, заведующая лабораторией клеточных технологий отдела экспериментальной и клинической кардиологии 0000-0002-8874-0788

Сосновый бульвар, 6, Кемерово, Российская Федерация, 650002

 

PhD, Head of the Laboratory of Cell Technologies, Department of Experimental and Clinical Cardiology

6, Sosnoviy Blvd., Kemerovo, Russian Federation, 650002

https://orcid.org/0000-0002-0450-2767ШабалдинаЕ. В.ShabaldinaE. V.

доктор медицинских наук, заведующая кафедрой оториноларингологии 0000-0002-0450-2767

 ул. Ворошилова 22а, Кемерово, Российская Федерация, 650056

PhD, Chairperson of the Department of Otorhinolaryngology

22a, Voroshilova St., Kemerovo, Russian Federation, 650029

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний»РоссияFederal State Budgetary Institution “Research Institute for Complex Issues of Cardiovascular Diseases”Russian FederationГосударственное бюджетное учреждение здравоохранения Кемеровской области «Кемеровский областной клинический кардиологический диспансер имени академика Л.С. Барбараша»РоссияState Budgetary Healthcare Institution of the Kemerovo Region “Kemerovo Regional Clinical Cardiology Dispensary n.a. Academician L.S. Barbarash”Russian FederationФедеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний», Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Кемеровский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияFederal State Budgetary Institution “Research Institute for Complex Issues of Cardiovascular Diseases”, Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education “Kemerovo State Medical University” of the Ministry of Healthcare of the Russian FederationRussian FederationГосударственное автономное учреждение здравоохранения Кемеровской области «Кемеровская областная клиническая больница» имени С.В. БеляеваРоссияAutonomous Public Healthcare Institution “Kemerovo Regional Clinical Hospital n. a. S.V. Belyaeva”Russian FederationФедеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Кемеровский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияFederal State Budgetary Educational Institution of Higher Education “Kemerovo State Medical University” of the Ministry of Healthcare of the Russian FederationRussian Federation201916082019836071Copyright © Горшкова С.В., Шмулевич С.А., Шабалдин А.В., Деева Н.С., Цепокина А.В., Лукоянычева Е.Б., Вавин Г.В., Антонова Л.В., Шабалдина Е.В., 20192019Горшкова С.В., Шмулевич С.А., Шабалдин А.В., Деева Н.С., Цепокина А.В., Лукоянычева Е.Б., Вавин Г.В., Антонова Л.В., Шабалдина Е.В.Gorshkova S.V., Shmulevich S.A., Shabaldin A.V., Deeva N.S., Tsepokina A.V., Lukoyanycheva E.B., Vavin G.V., Antonova L.V., Shabaldina E.V.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.nii-kpssz.com/jour/article/view/587

Основные положения Полученные данные оригинального исследования позволят выявлять нарушения в гуморальной регуляции иммунных взаимодействий матери и полуаллогенного по HLA эмбриона/плода, как фактора риска формирования спорадических пороков конотрункуса в последующем поколении.Цель Изучение роли женской аутосыворотки крови в ограничении аллогенных взаимодействий в краткосрочной культуре лимфоцитов супругов, имеющих детей с пороками конотрункуса.Материалы и методы Для выполнения поставленной цели обследована 21 семейная пара (основная группа), имеющая детей с пороками конотрункуса (тетрада Фалло) без хромосомных заболеваний. Контрольную группу составила 21 семья, имеющая трех и более здоровых детей. Иммунный ответ в смешанной культуре лимфоцитов (СКЛ) супругов оценивали по увеличению экспрессии HLA-DR в смешанной культуре по отношению к спонтанным культурам лимфоцитов. Первичная окраска женских и мужских лимфоцитов моноклональными антителами к CD45, конъюгированными с различными флуоресцентными красителями (PC-5 и PC-7), позволила оценить иммунный ответ женских лимфоцитов на мужские и наоборот.Результаты Проведена оценка эффекта женской аутосыворотки на СКЛ супругов. Результаты исследования показали, что рождение детей с пороками конотрункуса ассоциировано с блокирующим эффектом женской аутосыворотки в отношении экспрессии HLA-DR на субпопуляции женских лимфоцитов (CD3+, HLA-DR+) и активирующим эффектом на эти реакции в отношении субпопуляции женских лимфоцитов (CD3-, HLA-DR+). Эти эффекты женской аутосыворотки в опытной группе могут быть связаны с отсутствием блокирующих HLA-DR аутоантител и высоким синтезом цитокинов Т2- и Т3-хелперными лимфоцитами.Заключение В краткосрочной СКЛ отражаются эффекты женской аутосыворотки крови на аллогенные взаимодействия лимфоцитов супругов. Исследование коэффициента прироста и блокирующего коэффициента позволит выявлять нарушения в гуморальной регуляции иммунных взаимодействий матери и полуаллогенного по HLA эмбриона/плода, как фактора риска формирования спорадических пороков конотрункуса в последующем поколении. 

Highlights The findings of this original study ensure the detection of violations in the humoral regulation of the maternal immune interactions with semiallogeneic fetus, considered as a risk factor for developing sporadic conotruncal heart malformations in the next generation.Aim To study the role of female autoserum blood in limiting allogeneic interactions in short-term lymphocyte cultures of parents having children with conotruncal heart malformations.Methods 21 married couples (the study group) with children suffering from conotrucnal heart malformations (Tetralogy of Fallot) without chromosomal diseases were examined. The control group consisted of 21 families with three or more healthy children. The immune response in a mixed lymphocyte culture of parents was assessed by the increase in HLA-DR expression in the mixed culture with respect to spontaneous lymphocyte cultures. Primary staining of female and male lymphocytes with monoclonal antibodies to CD45, conjugated with various fluorescent dyes (PC-5 and PC-7), allowed assessing the immune response of female lymphocytes to male and vice versa.Results The effects of female autoserum on the mixed lymphocyte culture of parents were assessed. The obtained results reported that the birth of children with conotruncal heart malformations is associated with the interfering effect of female autoserum on HLA-DR expression on subpopulations of female lymphocytes (CD3+, HLA-DR+) and the activating effect on subpopulations of female lymphocytes (CD3-, HLA-DR+). The observed role of female autoserum in the study group may be associated with the absence of HLA-DR-blocking autoantibodies and high synthesis of cytokines by T2 and T3 helper lymphocytes.Conclusion The effects of female autoserum on allogeneic lymphocyte interactions of parents may be observed in short-term mixed lymphocyte cultures. The evaluation of the activating and interfering effects ensures timely identification of any violations in the humoral regulation of the maternal immune interactions with the HLA semiallogenic fetus, considered as a risk factor for developing sporadic conotruncal heart malformations in the next generation.

Смешанная культура лимфоцитовБлокирующие антителаПороки конотрункусаHLA-DRMixed lymphocyte cultureBlocking antibodiesConotruncal heart malformationsHLA-DRReferencesБокерия, Л.А., Гудкова Р.Г., Сердечно-сосудистая хирургия-2014. Болезни и врожденные аномалии системы кровообращения. М.: НЦССХ им. А.Н.Бакулева; 2015.Bokeriya, L.A., Gudkova R.G., Serdechno-sosudistaya hirurgiya-2014. Bolezni i vrozhdennye anomalii sistemy krovoobrashcheniya. Moscow: NCSSKH im. A.N.Bakuleva; 2015. (In Russian)Eurocat. Available at: httр: //www.eurocat/network.eu. (accessed 10.02.2016).Eurocat. Available at: httр: //www.eurocat/network.eu. (accessed 10.02.2016).Шабалдин А.В., Глебова Л.А., Бачина А.В., Счастливцев Е.Л., Потапов В.П. Особенности эпидемиологии врожденных пороков сердца у детей г. Кемерово как крупного промышленного центра. Комплексные проблемы сердечно-сосудистых заболеваний. 2014;(4):38-46.Shabaldin A.V., Glebova L.A., Bachina A.V., Schastlivcev E.L., Potapov V.P. Features of epidemiology of congenital heart diseases at children Kemerovo, as large industrial centre. Complex Issues of Cardiovascular Diseases. 2014;(4):38-46. (In Russian)Garcı́a-Enguı́danos A., Calle M.E., Valero J., Luna S., Domínguez-Rojas V. Risk factors in miscarriage and malformation: a review. European Journal of Obstetrics and Gynecology and Reproductive Biology. 2002; 102(2): 111-119. doi: https://doi.org/10.1016/S0301-2115(01)00613-3Garcı́a-Enguı́danos A., Calle M.E., Valero J., Luna S., Domínguez-Rojas V. Risk factors in miscarriage and malformation: a review. European Journal of Obstetrics and Gynecology and Reproductive Biology. 2002; 102(2): 111-119. doi: https://doi.org/10.1016/S0301-2115(01)00613-3Ganu R.S., Harris R.A., Collins K., Aagaard K.M. Early Origins of Adult Disease: Approaches for Investigating the Programmable Epigenome in Humans, Nonhuman Primates, and Rodents ILAR J. 2012; 53 (3-4): 306-321. doi: 10.1093/ilar.53.3-4.306Ganu R.S., Harris R.A., Collins K., Aagaard K.M. Early Origins of Adult Disease: Approaches for Investigating the Programmable Epigenome in Humans, Nonhuman Primates, and Rodents ILAR J. 2012; 53 (3-4): 306-321. doi: 10.1093/ilar.53.3-4.306Baack M.L., Wang C., Hu S., Segar J.L., Norris A.W. Hyperglycemia induces embryopathy, even in the absence of systemic maternal diabetes: an in vivo test of the fuel mediated teratogenesis hypothesis. Reprod Toxicol. 2014;46:129–136. doi:10.1016/j.reprotox.2014.03.013.Baack M.L., Wang C., Hu S., Segar J.L., Norris A.W. Hyperglycemia induces embryopathy, even in the absence of systemic maternal diabetes: an in vivo test of the fuel mediated teratogenesis hypothesis. Reprod Toxicol. 2014;46:129–136. doi:10.1016/j.reprotox.2014.03.013.Liddy K.A., White M.Y., Cordwell S.J..Functional decorations: post-translational modifications and heart disease delineated by targeted proteomics Genome Med. 2013; 5(2): 20. DOI: 10.1186/gm424Liddy K.A., White M.Y., Cordwell S.J..Functional decorations: post-translational modifications and heart disease delineated by targeted proteomics Genome Med. 2013; 5(2): 20. DOI: 10.1186/gm424Oyama K., El-Nachef D., Zhang Y., Sdek P. MacLellan W.R. Epigenetic regulation of cardiac myocyte differentiation. Frontiers in Genetics, 2014; 5:375. doi: 10.3389/fgene.2014.00375.Oyama K., El-Nachef D., Zhang Y., Sdek P. MacLellan W.R. Epigenetic regulation of cardiac myocyte differentiation. Frontiers in Genetics, 2014; 5:375. doi: 10.3389/fgene.2014.00375.Сепиашвили Р. И. Функциональная система иммунного гомеостаза Аллергология и иммунология. 2015; 16(1): 91-100.Sepiashvili R. I. Funkcional'naya sistema immunnogo gomeostaza Allergologiya i immunologiya. 2015; 16(1): 91-100. (In Russian)Morin-Papunen L., Tiilikainen A., Hartikainen-Sorri A.L. Maternal HLA immunization during pregnancy: presence of anti HLA antibodies in half of multigravidous women. Med Biol. 1984; 62(6): 323-325.Morin-Papunen L., Tiilikainen A., Hartikainen-Sorri A.L. Maternal HLA immunization during pregnancy: presence of anti HLA antibodies in half of multigravidous women. Med Biol. 1984; 62(6): 323-325.Koichi I., Tadao T., Norio T. Possible mechanisms of immunotherapy for maintaining pregnancy in recurrent spontaneous aborters: analysis of anti-idiotypic antibodies directed against autologous T-cell receptors. Human Reproduction. 1999; 14(3): 650–655;Koichi I., Tadao T., Norio T. Possible mechanisms of immunotherapy for maintaining pregnancy in recurrent spontaneous aborters: analysis of anti-idiotypic antibodies directed against autologous T-cell receptors. Human Reproduction. 1999; 14(3): 650–655.Miranda S., Litwin S., Barrientos G. Dendritic cells therapy confers a protective microenvironment in murine pregnancy. Scand J Immunol. 2006; 64(5): 493-499.Miranda S., Litwin S., Barrientos G. Dendritic cells therapy confers a protective microenvironment in murine pregnancy. Scand J Immunol. 2006; 64(5): 493-499.Ярилин А. А. Иммунологии: учебник. M: Изд-во «ГЭОТАР-Медиа»; 2010. [YArilin A. A. Immunologii: uchebnik. Moscow: GEOTAR-Media; 2010. (In Russian.)].YArilin A. A. Immunologii: uchebnik. Moscow: GEOTAR-Media; 2010. (In Russian)Inada K., Shima T., Nakashima A. Characterization of regulatory T cells in decidua of miscarriage cases with abnormal or normal fetal chromosomal content. J Reprod Immunol. 2013; 97(1): 104-111. doi: 10.1016/j.jri.2012.12.001;Inada K., Shima T., Nakashima A. Characterization of regulatory T cells in decidua of miscarriage cases with abnormal or normal fetal chromosomal content. J Reprod Immunol. 2013; 97(1): 104-111. doi: 10.1016/j.jri.2012.12.001;Чистякова Г.Н., Шабалдин А.В., Беленкова О.В., Мозес В.Г., Матвеева В. Г., Шабалдина Е. В., Ремизова И. И., Газиева И. А.; Федеральное государственное бюджетное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества" Министерства здравоохранения Российской Федерации, патентообладатель. Способ определения аллогенного иммунного ответа в кратковременной смешанной культуре лимфоцитов неродственных доноров. Патент РФ 2581925. 20.02.2016.CHistyakova G.N., SHabaldin A.V., Belenkova O.V., Mozes V.G., Matveeva V. G., SHabaldina Е. V., Remizova I. I., Gazieva I. A. Federal'noe gosudarstvennoe byudzhetnoe uchrezhdenie "Ural'skij nauchno-issledovatel'skij institut ohrany materinstva i mladenchestva" Ministerstva zdravoohraneniya Rossijskoj Federacii, patentoobladatel' Sposob opredeleniya allogennogo immunnogo otveta v kratkovremennoj smeshannoj kul'ture limfocitov nerodstvennyh donorov. Patent RF 2581925. 20.02.2016. (In Russian)Самбур М.Б. Способ оценки взаимодействия лимфоцитов in vitro, основанный на определении их розеткообразующей способности. Иммунология. 1991; 2: 30-33.Sambur M.B. Sposob ocenki vzaimodejstviya limfocitov in vitro, osnovannyj na opredelenii ih rozetkoobrazuyushchej sposobnosti. Immunologiya. 1991; 2: 30-33 (In Russian)Singh M., Orazulike N. C., Ashmore J., Konje J. C. Changes in maternal serum transforming growth factor beta-1 during pregnancy: a cross-sectional study. BioMed research international. 2013;2013:318464 doi: 10.1155/2013/318464.Singh M., Orazulike N. C., Ashmore J., Konje J. C. Changes in maternal serum transforming growth factor beta-1 during pregnancy: a cross-sectional study. BioMed research international. 2013;2013:318464 doi: 10.1155/2013/318464.Li Q. Transforming growth factor β signaling in uterine development and function. J Anim Sci Biotechnol. 2014;5(1):52. doi:10.1186/2049-1891-5-52;Li Q. Transforming growth factor β signaling in uterine development and function. J Anim Sci Biotechnol. 2014;5(1):52. doi:10.1186/2049-1891-5-52;Chatterjee P., Chiasson V.L., Bounds K.R., Mitchell B.M. Regulation of the Anti-Inflammatory Cytokines Interleukin-4 and Interleukin-10 during Pregnancy. Front Immunol. 2014;5:253. doi:10.3389/fimmu.2014.00253.Chatterjee P., Chiasson V.L., Bounds K.R., Mitchell B.M. Regulation of the Anti-Inflammatory Cytokines Interleukin-4 and Interleukin-10 during Pregnancy. Front Immunol. 2014;5:253. doi:10.3389/fimmu.2014.00253.Ширшев С.В. Гормональные механизмы регуляции иммунной системы в период беременности. Успехи соврем. биологии. 2005; 6: 555-566.Shirshev S.V. Gormonal'nye mekhanizmy regulyacii immunnoj sistemy v period beremennosti. Uspekhi sovrem. biologii. 2005; 6: 555-566 (In Russian)Mjosberg J., Berg G., Jenmalm M.C., Ernerudh J. FOXP3+ regulatory T cells and T helper 1, T helper 2, and T helper 17 cells in human early pregnancy deciduas. Biol Reprod. 2010. 82(4): 698-705. doi: 10.1095/biolreprod.109.081208.Mjosberg J., Berg G., Jenmalm M.C., Ernerudh J. FOXP3+ regulatory T cells and T helper 1, T helper 2, and T helper 17 cells in human early pregnancy deciduas. Biol Reprod. 2010. 82(4): 698-705. doi: 10.1095/biolreprod.109.081208.Хаитов Р. М., Алексеев Л. П., Кофиади И. А. Роль иммуногенетики в решении фундаментальных и прикладных задач персонализированной медицины. Медицина экстремальных ситуаций. 2016; 3:(57): 9-24.Haitov R. M., Alekseev L. P., Kofiadi I. A. Rol' immunogenetiki v reshenii fundamental'nyh i prikladnyh zadach personalizirovannoj mediciny. Medicina ekstremal'nyh situacij. 2016; 3:(57): 9-24. (In Russian)Газиева И.А., Чистякова Г.Н., Ремизова И.И. Роль нарушений продукции цитокинов в генезе плацентарной недостаточности и ранних репродуктивных потерь. Медицинская иммунология. 2014; 16(6): 539-550. doi:10.15789/1563-0625-2014-6-539-550.Gazieva I.A., Chistyakova G.N., Remizova I.I. Role of cytokine production disorders in genesis of placental insufficiency and early reproductive losses. Medical Immunology (Russia). 2014;16(6):539-550. (In Russian) https://doi.org/10.15789/1563-0625-2014-6-539-550Robertson S.A., Prins J. R., Sharkey D. J., Moldenhauer L.M. Seminal fluid and the generation of regulatory T cells for embryo implantation. Am J Reprod Immunol. 2013; 69(4): 315-303.Robertson S.A., Prins J. R., Sharkey D. J., Moldenhauer L.M. Seminal fluid and the generation of regulatory T cells for embryo implantation. Am J Reprod Immunol. 2013; 69(4): 315-303;Беленкова О.В., Мозес В.Г., Шабалдин А.В., Шабалдина Е.В. Характер аллогенных взаимодействий супругов в кратковременной смешанной культуре при иммунных формах репродуктивных потерь. Журнал теоретической и клинической медицины (Узбекистан). 2014; 3(1): 219-222.Belenkova O.V., Mozes V.G., SHabaldin A.V., SHabaldina Е.V. Harakter allogennyh vzaimodejstvij suprugov v kratkovremennoj smeshannoj kul'ture pri immunnyh formah reproduktivnyh poter'. ZHurnal teoreticheskoj i klinicheskoj mediciny (Uzbekistan). 2014; 3(1): 219-222. (In Russian)Беленкова О.В., Мозес В.Г., Шабалдин А.В., Лисаченко Г.В. Показатели аллогенных взаимодействий лимфоцитов супругов как дополнительные диагностические и прогностические критерии иммунных форм репродуктивных потерь. Саратовский научно-медицинский журнал. 2013; 4(9): 649-652.Belenkova O.V., Mozes V.G., SHabaldin A.V., Lisachenko G.V. Pokazateli allogennyh vzaimodejstvij limfocitov suprugov kak dopolnitel'nye diagnosticheskie i prognosticheskie kriterii immunnyh form reproduktivnyh poter'. Saratovskij nauchno-medicinskij zhurnal. 2013; 4(9): 649-652. (In Russian)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.